Cygnus technologies, Inc.是美國一家專門從事生物工程和制藥過程中殘留物檢測的一系列產品。生物制品生產過程中存在許多影響產品質量的殘留物，諸如特殊重組表達系統中宿主細胞蛋白（ Host Cell protein, HCP ）的殘留以及生物制品加工過程中培養物殘留的污染物。公司提供了廣泛而靈敏度*的一系列用于檢測生物工程殘留物的產品，

        Cygnus公司檢測產品覆蓋了常用于基因工程的培養細胞以及一些用于細胞培養的添加物。CHO細胞即中國倉鼠卵巢細胞（Chinese hamster ovary），該細胞具有不死性，可以傳代百代以上，是目前生物工程上廣泛培養的細胞。*批準正式應用于人類疾病治療或疾病預防的基因工程產品約有三十多種，其中只有一種（乙肝疫苗）是由酵母菌生產的，其余所有產品都是由CHO細胞和大腸桿菌生產的，大腸桿菌不能形成有活性的二聚體（如白介素2），也不具有糖基化的功能（如EPO），而CHO卻具有如上的功能，因此CHO成為表達復雜生物大分子的理想宿主。另外CH0細胞在基因工程使用中還有一個優點，該細胞屬于成纖維細胞（fibroblast），是一種非分泌型細胞，它本身很少分泌CHO內源蛋白，因而檢測起來很困難。

上海起發現貨Cygnus F300說明書

MRC5 HCP ELISA Kit (F300)

描述

MRC5（人類胎兒肺成纖維細胞）細胞系是生產疫苗的經濟有效的方法，可支持多種病毒的生長。我們的檢測資格確定該試劑盒的LOD為?1.8 ng / ml。

產品信息

產品類別：

ELISA試劑盒

存儲：

所有試劑盒試劑2°C至8°C

目標表達系統：

MRC5

物種組：

哺乳動物

種類：

人的

預期用途

本試劑盒用于測定MRC5細胞重組表達產物中MRC5宿主細胞蛋白雜質的存在。

該工具包僅用于研究和制造，不用于人類或動物的診斷用途。

總結與說明

在mrc5細胞系中進行重組蛋白表達或病毒復制是生產疫苗或其他治療性蛋白的一種經濟有效的方法。

這些產品中的許多是作為治療劑用于人和動物，因此必須高度純化。制造業和

這些產品的純化過程使得MRC5中的宿主細胞蛋白（HCP）有可能產生雜質。這些雜質會降低治療劑的療效，并導致不良的毒性或免疫反應。因此，將hcp雜質降低到低水平是可取的。通常采用western blot和elisa等抗hcp抗體的實用免疫學方法。雖然western blot是一種有助于鑒別hcps的有效方法，但它有許多局限性。western blot是一個復雜的、依賴于技術的過程，需要主觀的

結果解釋。此外，它本質上是一種定性方法，不適合于獲得定量答案。western blot的靈敏度受到可檢測樣品體積和高濃度預期產品干擾的嚴重限制。雖然western blot可以在純化過程中檢測到上游樣品中的hcps，但它往往缺乏足夠的敏感性和特異性來檢測純化下游和終產品中的hcps。本試劑盒采用微量平板免疫酶聯免疫吸附試驗（elisa）方法，克服了western blots檢測靈敏度高達100倍的局限性，操作簡便，靈敏度高，客觀。半定量elisa是一種有助于純化工藝優化、工藝控制、常規質量控制和產品釋放度檢測的有效方法。該試劑盒是“通用”的，其目的是與所有可能污染產品的六氯環己烷反應，而不受凈化過程。抗體已經產生并具有親和力 用溫和的MRC5細胞裂解液純化，得到HCP，通常在初始產品回收步驟中遇到。western blot作為一種初步的方法，證實抗體對page分離得到的大多數hcp條帶有反應。如果你需要一種更敏感和更具體的方法來證明你的樣品中的單個HCP的反應性，如果你需要一種更敏感的方法來證明你的過程中HCP的覆蓋率，Cygnus Technologies推薦一種優于Western Blot的方法，稱為抗體親和提取（aae）。aae-is對western blot的敏感性和特異性大大提高，使其成為elisa中抗體表現的更好的預測因子。